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Nana Mouskouri wurde am 13. Oktober 2014 als Ioanna Mouskhouri in der Stadt Chania auf der griechischen Insel Kreta geboren. Vom Sternzeichen ist die damit Waage.
Schon im Alter von 15 Jahren begann sie ihre musikalische Ausbildung am Hellenischen Konservatorium in Athen in den Fächern Gesang, Klavier und Harmonielehre. Dass sie sich aber im Laufe der Jahre immer mehr dem Jazz zuwandte, konnte das Konservatorium nicht gutheißen. Mit 23 Jahren wurde sie ohne Diplom ausgeschlossen.
1958 schloss sie sich den Athenians, einem Quartett, das Jazz in kleinen Clubs der Hauptstadt spielte. So schloss sie auch Bekanntschaft mit dem Komponisten Manos Hadjidakis, dessen Lieder ihr den Durchbruch brachten.
1959 gewann sie mit dem Titel "Kapou yparchi i agapi mou" das Festival de la Chanson Héllenique. Nur ein Jahr später konnte sie in Barcelona ihren ersten internationalen Preis gewinnen.
Der große internationale Durchbruch gelang ihr mit dem Lied "Weiße Rosen aus Athen, das 1961 veröffentlicht wurde. Die Single verkaufte sich in den ersten sechs Monaten über anderthalb Millionen mal. Weitere ihrer größten Hits sind "Ich schau den weißen Wolken nach" (1962), "Einmal weht der Südwind wieder" ( 1962) und "Only Love" (1986), mit dem sie Platz zwei der britischen Charts eroberte.
Bis heute hat Nana Mouskour 23 Alben veröffentlicht, über 250 Millionen Tonträger verkauft und Konzerte auf der ganzen Welt gespielt. Dabei hat sie, anders als viele andere Künstler, niemals eine längere Schaffenspause eingelegt.
Eines ihrer Markenzeichen ist ihre unglaubliche Vielsprachigkeit. So erschien "Weiße Rosen aus Athen" nicht nur auf Deutsch und Griechisch, sondern auch auf Französisch, wo das Lied den Titel "Roses blanches de Corfou" trägt. Insgesamt sang sie in ihrer Karriere schon in Griechisch, Französisch, Deutsch, Englisch, Spanisch, Italienisch, Niederländisch, Portugiesisch, Japanisch, Russisch, Wallonisch und Hebräisch.
Ihre äußerlichen Markenzeichen sind ihre langen schwarzen Haare und ihre schwarzgerahmte Brille. Inzwischen besitzt sie davon nach eigener Aussage über 100 verschiedene Modelle.
Nana Mouskouri nahm auch immer aktiv an der Politik teil. Ihre offene Opposition gegen die griechische Militärdiktatur der Obristen zwang sie in den 60er dazu, über zwanzig Jahre lang im Exil zu leben. Von 1993 bis 2013 war sie Unicef-Sonderbeauftragte und zwischen 1994 und 1999 saß sie als Europaabgeordnete der Nea Dimokratia in Brüssel.
Nana Mouskouri war in erster Ehe von 1960 bis 1976 mit Georgios Petsilas verheiratet, mit dem sie die beiden Kinder Niolas (*1968) und Hélène (*1970) hat. Seit 2003 ist sie mit ihrem langjährigen Produzenten, dem Franzosen André Chapelle, verheiratet. Sie lebt heute abwechselnd in Genf und Paris.